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DAPI染色试剂盒可用于细胞凋亡检测，也可用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色，染色后可用荧光显微镜检测或流式细胞仪检测。DAPI(diamidino-2-phenylindole)能与双链 DNA小槽，特别是AT 碱基结合，也可插入少于3个连续AT 碱基对的DNA 序列中。当它与双链DNA 结合时，荧光强度增强20倍，而与单链DNA 结合则无荧光增强现象，因此是一种简易、快速和敏感地检测DNA的方法。DAPI的荧光强度较Hoechst低，但荧光稳定性优于Hoechst；其特异性较溴化乙啶和碘化丙啶高。

储存条件：4℃避光保存。长期保存-20℃避光保存。
有效期：六个月。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● DAPI有毒，避免皮肤或粘膜与试剂接触。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● PBS ● 甲醇 ● 移液器及吸头 ●荧光显微镜

使用方法：

使用注意事项：
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
●细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
●染色后立即进行分析。
●染色时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。
●本染色液可用于石蜡切片、冰冻切片、细胞涂片、细胞的检测。石蜡切片用常规方法脱蜡、分化、
冰冻切片用冰丙酮固定后检测。
以下以培养细胞的涂片的荧光显微镜检测为例，细胞染色也可不固定，其他方法请参阅相关资料。

1．染色工作液的配制：
根据样品数用 PBS 将DAPI染色液20-100倍稀释，配制成染色工作液。
2．细胞涂片的制备：
贴壁细胞，可将盖玻片放于培养器皿中，让培养细胞长于玻片上，然后用药物诱导细胞凋亡后取出，用4%多聚甲醛固定5min。也可其他方式培养后收集细胞制作涂片检测。
对于悬浮细胞，用药物诱导细胞凋亡后，1000-2000rpm离心5分钟收集细胞，用PBS洗2次，收集调整细胞数为1×105/ml，涂片或用离心涂片，用4%多聚甲醛固定5min；
3．用PBS 洗涤涂片两次。
4．加适量染色工作液于涂片上，室温避光染色5-20分钟。
5．用10倍稀释(用双蒸水稀释)的试剂B 洗涤涂片。
6．用荧光显微镜检测结果。染料-DNA 复合物的最大激发波长为360nm，最大发射波长为454nm。

结果分析：
置于荧光显微镜下用360nm 激发光观察结果：DAPI染色呈蓝白色荧光。早期凋亡细胞呈现核浓缩，染色加深，或核染色质呈新月形聚集于核膜一边；晚期凋亡细胞表现为核碎裂成大小不等的圆形小体，并被细胞膜所包绕，即凋亡小体。
相关搜索：DAPI染色试剂盒